1.主要采用发酵法生产 原料为:糖蜜、蔗糖、甘薯和石油烃等碳水化合物; 采用的发酵法为:真菌为菌种发酵生产; 发酵方式为:表面发酵和深层发酵; 表面发酵:早期的生产方法,用某些青霉菌或黑曲霉菌为菌种; 深层发酵法:以黑曲霉菌为菌种,发酵过程中生成小球形的丝菌聚集体,应避免生成长而薄的丝菌体,发酵条件为pH值1.5-2.8,同时需通入无菌空气并伴随搅拌,发酵完毕过滤除去丝菌体及残存的固体渣滓,滤液用碳酸钙中和获得柠檬酸钙,然后用浓硫酸中和得柠檬酸粗品,再经离子交换树脂精制、浓缩和结晶得到成品; 以深层发酵法为主,约占发酵法产量的80%; 工艺流程: (1)菌种培养:柠檬酸工业生产的菌种主要有黑曲霉和解脂假丝酵母等,前者是现在工业是应用最有竞争力的菌种。 ①黑曲霉的培养:向密度为1.036g每平方立米左右的麦汁内加入25%-30%的琼脂,然后接入黑曲霉菌种,在31℃左右培养4d。将麸皮、水以1:1的比例掺拌,加入10%碳酸钙、0.5%的硫酸铵,拌匀后装入250ml的三角瓶中,用981×1.5KPa压力灭菌60min,接入上述已培养的菌种,培养96-120h即可使用; ②解脂假丝酵母培养:该酵母一般都是从含有动植物油或矿物油的材料中分离出来的,经富集培养、平板分离培养,所得培养基经常规摇瓶方法初筛,可得培养基,再经诱导有种,制得用于工业发酵的解脂假丝酵母。这种酵母可由烷烃发酵生产柠檬酸,也可由糖类发酵生产柠檬酸; (2)发酵工艺:目前生产柠檬酸主要有以下3种方法。 ①表面发酵法:此法又称浅层发酵法,其理想原料为甜菜糖蜜。将原料糖蜜先送入煮沸锅内加等体积水煮沸15-30min,依次加黄血盐和EDTA二钠盐煮沸灭菌,再用无菌水配成含糖蜜12%-16%的发酵培养基液。加入适量的硫酸铵、磷酸二氢钾作为氮源和营养盐:将培养基液在45-50℃下送入发酵室内装入浅底的铝盘或不锈钢盘中,液层厚度为1.5-2.5cm。按75mg每平方立米干孢子接入黑曲霉干孢,在温度为35℃、pH<下发酵6-12d,而得柠檬成品。糖蜜(40%-50%)消耗定额3 t/t; ②固体表面发酵工艺:将果渣晾干、粉碎后,每100kg干渣加入碳酸钙2kg碳酸铵0.7kg在蒸锅内常压下蒸料90min,杀死杂菌及使原料中淀粉糊化;将蒸好的物料摊晾到37℃以下,立即补水接种,种曲用量为干渣质量的0.2%-0.3%。将物料装入曲盘中,装料厚度为6-8cm,曲盘材料可为木质、铁质或铝质,盘底最好是假底或多孔筛板,以利通气。将曲盘送进曲房,在38-43℃下发酵80h,用80℃热水将发酵物中的柠檬酸浸出后,经过滤、中和、酸解、脱色、浓缩、结晶等步骤制得柠檬酸成品; ③深层发酵法:先在发酵罐内配制含量为18%-20%的山芋粉悬浮液,加入α淀粉酶液化,然后于110-115℃保温灭菌,冷却后接入黑曲霉菌种,在35℃恒温下通气发酵60-70h,发酵液pH值为2。产酸含量为12%-15%,终点时发酵液含糖小于1%。营养物可加入0.2%的无机铵盐,发酵罐为不锈钢或内壁涂以环气树脂的碳钢罐,内设有多层涡轮搅拌器,其转速为50-100r/min,发酵液经板框过滤机或真空转鼓过渡机除去菌丝体及固形物,滤液用含量为40%-50%氢氧化钙水溶液中和生成柠檬酸沉淀。经过滤后,用20%的稀硫酸酸解制得柠檬酸水溶液,酸解温度为70-80℃柠檬酸水溶液经活性炭脱色,离子交换除去金属、硫酸根、氯根等杂质后,进入双效蒸发器浓缩,蒸发温度50-65℃,真空度79.98-93.31kpa ,出料含量70%-80%。浓缩液经冷却、结晶、离心及干燥后制得柠檬酸成品。消耗定额:山芋粉2.3t/t,α淀粉酶6kg/t,工业硫酸(98%)1.05t/t,碳酸钙(98%)1200 kg/t,盐酸(32%)500kg/t,电1200KW·h/t,蒸汽5t/t,水陆联运。4.5t/t; (3)柠檬酸的提取:经发酵所得的发酵酸,经过滤出菌体、残渣,再经加石灰乳中和、碳酸钙过滤而得碳酸钙盐;然后加硫酸酸解、过滤而得粗酸液;再经净化,通过吸附脱色和离子交换树脂交换,除去前述溶液中酸含有的色素和胶体物质,其中有铁、钙、铜和镁等多种金属阳离子,以及硫酸根等杂质;然后经浓缩到柠檬酸含量20%-25%,通过在沸腾状态下迅速蒸发,浓缩到70%以上,即可进行结晶。其中中和与酸解两步反应为中和:由柠檬酸与钙或钙碱(石灰乳)反应制得柠檬酸钙。酸解:由中和所得柠檬酸钙用硫酸酸解,可得柠檬酸。结晶:不仅要求产品纯度高、回收率高,而且对产品的晶形、晶粒度也有严格要求,这是影响成品质量的关键环节之一。结晶的方法有一水柠檬酸结晶法和无水柠檬酸结晶法; ①一水柠檬酸结晶法:当浓缩液含量约达80%、温度达55℃时,已呈过饱和状态,然后将其放入结晶器中,开动搅拌,任其自然冷却,当温度到40℃以下时,可以刺激起晶或添加晶种,冷却,控制温度不超过36℃,以保证柠檬酸以一水柠檬酸形式析出,如超过36.6℃则会结晶出无水柠檬酸。当结晶体系温度到10℃以下,结晶工序即可结束,整个结晶时间约为10h。再经过干燥即产品一水柠檬酸; ②无水物柠檬酸结晶法:生产无水物柠檬酸结晶,要求温度较高,不能用冷却结晶器。无水柠檬酸生产用的蒸发式结晶器,必须在真空下操作,因为操作温度不得超过60℃ ;溶液在100℃下浓缩到含柠檬酸83%,即可停止加热,当冷却到46℃左右,经加入晶种,可维持温度在40-45℃,最终降温到38℃,结晶完毕。再以低速(50-60r/min)开动离心机,将晶种用喷洒洗涤水洗涤;再经烘房干燥,而得无水柠檬酸成品。发酵液中添加钙、镁、钠、钾等金属离子,可提高柠檬酸产量10%,添加氨基酸可增加60%-80%; 2.直接结晶法 如果发酵得到的是高纯度和近于无色的柠檬酸水溶液,则在上述步骤中过滤分离硫酸钙,但从最后母液中回收柠檬酸仍需要使用沉淀法; |